【手把手教你用Quantity（One计算电泳条带的分子量）】在蛋白质电泳实验中，通过凝胶成像系统获取图像后，通常需要使用软件对电泳条带进行分析，以确定其分子量。其中，Quantity One 是一款常用的图像分析软件，广泛应用于 Western Blot 和 SDS-PAGE 等实验中。本文将详细介绍如何使用 Quantity One 软件来计算电泳条带的分子量。
一、操作步骤总结
| 步骤 | 操作内容 | 说明 |
| 1 | 打开 Quantity One 软件 | 进入软件主界面 |
| 2 | 导入电泳图像 | 选择“File”→“Open”导入保存的图像文件 |
| 3 | 设置图像参数 | 根据需要调整亮度、对比度等参数 |
| 4 | 添加标准品标记 | 使用“Marker”功能标注已知分子量的标准蛋白 |
| 5 | 绘制标准曲线 | 选择“Curve Fit”功能，输入标准品分子量和对应的迁移距离 |
| 6 | 分析目标条带 | 使用“Gel”→“Analyze”功能，选择目标条带并测量其迁移距离 |
| 7 | 计算分子量 | 根据标准曲线和迁移距离，自动计算出目标条带的分子量 |
二、关键注意事项
- 标准品选择：应选用与实验样品分子量范围匹配的蛋白分子量标准品。
- 迁移距离测量：确保测量的是从点样孔到条带中心的距离，避免误差。
- 软件版本差异：不同版本的 Quantity One 可能存在操作界面或功能上的细微差别，建议参考软件帮助文档。
- 数据验证：可结合其他方法（如质谱）对计算结果进行交叉验证。
三、表格示例（模拟数据）
| 条带编号 | 迁移距离（mm） | 标准品分子量（kDa） | 计算分子量（kDa） | 备注 |
| 1 | 30 | 200 | 198 | 高表达 |
| 2 | 45 | 150 | 147 | 中等表达 |
| 3 | 60 | 100 | 98 | 低表达 |
| 4 | 75 | 50 | 48 | 未知蛋白 |
通过以上步骤和注意事项，可以较为准确地利用 Quantity One 软件完成电泳条带的分子量计算。在实际操作中，建议多次重复实验以提高数据的可靠性，并结合其他实验手段进行综合判断。
